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Reinigung, biochemische und biophysikalische Charakterisierung einer sauren α-Galactosidase aus den Samen von Annona squamosa (Puddingapfel)

Reinigung, biochemische und biophysikalische Charakterisierung einer sauren α-Galactosidase aus den Samen von Annona squamosa (Puddingapfel)

 

Alpha-Galactosidase ist eine Exoglycosidase, die α-D-Galactose spaltet und zahlreiche Anwendungen in der Medizin-, Biotechnologie-, Lebensmittel- und Pharmaindustrie hat. In dieser Studie wurde eine niedermolekulare saure α-Galactosidase aus den Samen von Puddingapfel identifiziert. Die Reinigung von α-Galactosidase aus dem Rohextrakt entfetteter Samen wurde unter Verwendung von Ammoniumsulfatfraktionierung, hydrophober Wechselwirkung und Gelfiltrationschromatographietechniken erreicht. Die gereinigte Puddingapfel-α-Galactosidase (CaG) wanderte als einzelne Bande in nativer PAGE entsprechend einem Molekulargewicht von ~ 67 kDa und gespaltenen chromogenen, fluorogenen und natürlichen Substraten.

Es wurde gefunden, dass CaG ein Heterodimer mit Untereinheitenmassen von 40 und 30 kDa ist. Die kinetischen Parameter wie KM und Vmax betrugen mit p-Nitrophenyl-α-D-galactopyranosid 0,67 mM bzw. 1,5 U / mg. Galactose, Methyl-α-D-Galactopyranosid und D-Galacturonsäure hemmten die CaG-Aktivität im gemischten Modus. Die CD-Spektralanalyse im fernen UV-Bereich zeigte, dass gereinigtes CaG in seiner Sekundärstruktur überwiegend als Helix (35%), Beta-Faltblätter (16,3%) und Zufallsspulen (32,3%) vorliegt. Diese biochemischen und biophysikalischen Eigenschaften von CaG führen zum Verständnis seiner Primärsequenz und seiner Glykanstrukturen, die schließlich seine neuartigen physiologischen Rollen in Pflanzen und potenziellen industriellen Anwendungen definieren werden.

In diesem Artikel wird der Einfluss von Faktoren auf die Produktinnovation untersucht, die auf der Transformation und Nutzung von Wissen aus den organisationsinternen Beziehungen eines Unternehmens beruhen. Insbesondere analysiert dieses Papier den Einfluss des intraorganisatorischen Sozialkapitals (SC) (d. H. Bestehend aus strukturellen, relationalen und kognitiven Dimensionen) auf die realisierte Absorptionskapazität (RACAP). Darüber hinaus wird die Vermittlerrolle von RACAP in Bezug auf die Beziehung zwischen internem SC und Produktinnovation analysiert. Basierend auf einer Stichprobe von Unternehmen aus der spanischen biotechnologischen und pharmazeutischen Industrie wurden zwei Hypothesen unter Verwendung eines Strukturgleichungsmodells und der PLS-Technik (Partial Least Squares) getestet.

Die Ergebnisse stützen beide Hypothesen, was darauf hindeutet, dass die Entwicklung starker und enger Verbindungen, die auf einem gemeinsamen Verständnis und Vertrauen der Unternehmensmitglieder beruhen, das Unternehmen dazu veranlasst, dynamische Fähigkeiten zur Transformation und Nutzung von extern erworbenem Wissen zu entwickeln, was Innovationen auf der Grundlage der Entwicklung neuer Produkte fördert. Forschungsgrenzen, Implikationen und zukünftige Forschung werden auch von den Autoren des Papiers diskutiert.

 

Intensive Bitterkeit von Molekülen: Maschinelles Lernen zur Beschleunigung der Wirkstoffentdeckung

Die Arzneimittelentwicklung ist ein langer, teurer und mehrstufiger Prozess, der darauf abzielt, sichere Arzneimittel mit hoher Wirksamkeit zu erzielen. Eine entscheidende Voraussetzung für den Abschluss des Medikationsschemas für orale Medikamente, insbesondere für pädiatrische und geriatrische Bevölkerungsgruppen, ist das Erreichen eines Geschmacks, der die Compliance nicht behindert. Derzeit wird der aversive Geschmack von Arzneimitteln in späten Stadien klinischer Studien getestet. Dies kann zu einer Neuformulierung führen, die möglicherweise dazu führt, dass mehr Tiere für zusätzliche Toxizitätsversuche verwendet werden, die finanziellen Kosten steigen und die Markteinführung verzögert wird.

Hier präsentieren wir BitterIntense, ein Werkzeug für maschinelles Lernen, das Moleküle aufgrund ihrer chemischen Struktur in “sehr bitter” oder “nicht sehr bitter” klassifiziert. Das Modell, das auf chemisch verschiedenen Verbindungen trainiert wurde, weist bei mehreren Testsätzen eine Genauigkeit von über 80% auf. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass etwa 25% der Arzneimittel als sehr bitter vorhergesagt werden, wobei die Prävalenz (~ 40%) bei COVID19-Arzneimittelkandidaten und bei mikrobiellen Naturstoffen noch höher ist. Es wird vorausgesagt, dass nur ~ 10% der toxischen Moleküle stark bitter sind, und es wird auch vermutet, dass intensive Bitterkeit nicht mit der Hepatotoxizität von Arzneimitteln korreliert.

Sehr bittere Verbindungen können jedoch kardiotoxischer sein als nicht sehr bittere Verbindungen, die signifikant niedrigere QPlogHERG-Werte besitzen. BitterIntense ermöglicht eine schnelle und einfache Vorhersage der starken Bitterkeit von Verbindungen, die für die Lebensmittel-, Pharma- und Biotechnologieindustrie von Interesse sind. Wir schätzen, dass die Implementierung von BitterIntense oder ähnlichen Tools zu Beginn des Arzneimittelentdeckungsprozesses zu einer Verringerung der Verzögerungen, des Tiergebrauchs und der finanziellen Gesamtbelastung führen kann.

Reinigung, biochemische und biophysikalische Charakterisierung einer sauren α-Galactosidase aus den Samen von Annona squamosa (Puddingapfel)

Empfehlungen zur Straffung und Standardisierung der Machbarkeitsbewertungen für Standorte für klinische Studien: Eine ASCO-Forschungserklärung

Machbarkeitsbewertungen (FAs) sind wichtig, um die Standortfähigkeiten für die Durchführung klinischer Studien und ihre Eignung für bestimmte Studien zu ermitteln. Derzeitige FA-Methoden, die von Sponsoren von Biotechnologie- und Pharmaversuchen (Biotech-Pharma) und Auftragsforschungsorganisationen (CROs) verwendet werden, sind jedoch kostspielig, ineffizient, unnötig belastend und ressourcenintensiv. Diese Methoden verzögern den Start der Studie, wirken als Hindernis für die Teilnahme am Standort und verringern letztendlich den rechtzeitigen Zugang der Patienten zu klinischen Studien und neuartigen Behandlungen.
Methoden: Eine ASCO-Task Force wurde einberufen, um die spezifischen Belastungen und Herausforderungen der FA zu bewerten und Empfehlungen zur Verbesserung ihrer Effizienz und Effektivität zu entwickeln. Stakeholder (einschließlich Versuchsstandorte, Biotech-Pharma-Sponsoren und CROs) gaben Einblicke in Herausforderungen und boten Lösungen durch zwei Umfragen und ein persönliches Treffen an.

Die Task Force nutzte das Feedback, um Konsensempfehlungen zur Verbesserung der FAs für klinische Studien in der Onkologie zu formulieren.
Ergebnisse: Drei wichtige Empfehlungen wurden für die Anwendung in allen von Biotech-Pharma gesponserten Studien ermittelt: (1) Implementierung eines optimierten und einheitlichen FA-Prozesses in allen Studien und Sponsoren; (2) Fragen minimieren und standardisieren; und (3) Nutzung von Technologie zur Zentralisierung von FAs, Erleichterung der Kommunikation und Reduzierung von Redundanzen.
Schlussfolgerung: Es ist dringend erforderlich, den derzeitigen FA-Prozess zu verbessern, der kostspielig, inkonsistent, ineffizient, arbeitsintensiv und von ungewisser Wirksamkeit ist.

 

Vornado™ miniature vortex mixer with red cup head, 100 to 240V with European 2 prong ADAPTER*

BV101-R-E 1 PC
EUR 224.6

MyBlock™ Mini Dry Bath, 100-240V (European 2 prong plug)

BSH200-E 1 PC
EUR 309.1

MyFuge™ 12 Mini Centrifuge 100-240V (European 2 prong plug)

C1012-E 1 PC
EUR 448.5

Incu-Mixer MP2™ Heated Plate Vortexer 115-240V European plug)

H6002-E 1 PC
EUR 1992.7

European Pesticide Mix 2017-170 100 ug/mL (100 ppm) 1mLin Acetonitrile.

EU-2017-170 1ML
EUR 78

MyBlock™ Mini dry bath with cooling, 100-240V (European 2 prong Plug)

BSH300-E 1 PC
EUR 817.6

MyBlock™ HL Mini Dry Bath with Heated Lid, 100-240V (European 2 prong plug)

BSH200-HL-E 1 PC
EUR 507.3

Orbi-Shaker™ Jr with rubber mat platform (9.5"x8"), 100-240V (European 2 prong plug)

BT302-E 1 PC
EUR 1182.1

MyFuge™ Mini Centrifuge, blue lid, with 2 rotors, 100-240V (European 2 prong plug)

C1008-B-E 1 PC
EUR 346.9

MyFuge™ Mini Centrifuge, clear lid, with 2 rotors, 100-240V (European 2 prong plug)

C1008-C-E 1 PC
EUR 346.9

MyFuge™ Mini Centrifuge, green lid, with 2 rotors, 100-240V (European 2 prong plug)

C1008-G-E 1 PC
EUR 346.9

EP Reagent Ruthenium Red Sol.

1075201 100ML
EUR 129.6

BenchWaver™ 3D Rocker with flat mat, 13.5x13" platform, 100-240V (European 2 prong plug)

B3D5000-E 1 PC
EUR 1518.6

Vornado™ miniature vortexer, grey cup head, 100 to 240V with European 2 prong PLUG*

BV101-E 1 PC
EUR 224.6

MyFuge™ Mini Centrifuge, purple lid, with 2 rotors, 100-240V (European 2 prong plug)

C1008-P-E 1 PC
EUR 346.9

EP Reagent Phenol Red Sol. R2

1063603 500ML
EUR 99.6

Congo Red

2588-100 each
EUR 144

Congo Red

2588-500 each
EUR 352.8

Congo Red

B7766-50 50 mg
EUR 154.8

Congo red

CB0324 50g
EUR 79.84

Congo Red

HY-D0236 500mg
EUR 159.6

Orbi-Shaker™ MP with 4 position micro plate platform, 100-240V (European 2 prong plug)

BT1502-E 1 PC
EUR 1145.9

EP Reagent Methyl Red Mixed Sol.

1055101 100ML
EUR 52.8

Vornado™ miniature vortex mixer with blue cup head, 100 to 240V with European 2 prong ADAPTER*

BV101-B-E 1 PC
EUR 224.6

Vornado™ miniature vortex mixer with green cup head, 100 to 240V with European 2 prong ADAPTER*

BV101-G-E 1 PC
EUR 224.6

Vornado™ miniature vortex mixer with purple cup head, 100 to 240V with European 2 prong ADAPTER*

BV101-P-E 1 PC
EUR 224.6

EP Reagent Indicator Sol. Methyl Red 0.02%

1055102 100ML
EUR 52.8

CP Reagent Coloration Primary Solution Red

CPPR01 100ML
EUR 206.4

Congo Red Powder

abx090680-5g 5 g
EUR 226.8

Congo Red Solution

CRA030 30 ml
EUR 88.8

Congo Red Solution

CRA500 500 ml
EUR 127.2

Congo Red Solution

CRA999 1000 ml
EUR 171.6

Congo Red (C.I. 22120)

GT5674-100G 100 g
EUR 74.4

Congo Red (C.I. 22120)

GT5674-250G 250 g
EUR 103.2

Congo Red (C.I. 22120)

GT5674-25G 25 g
EUR 54

Congo Red (C.I. 22120)

GT5674-100 100
EUR 31.7

Congo Red (C.I. 22120)

GT5674-25 25
EUR 16.4

Congo Red (C.I. 22120)

GT5674-250 250
EUR 55.4

EP Reagent Biuret Reagent

1011601 1L
EUR 52.8

EP Reagent Iodoplatinate Reagent

1046300 200ML
EUR 446.4

EP Reagent Molybdovanadic Reagent

1056700 100ML
EUR 52.8

EP Reagent Methoxyphenylacetic Reagent

1053601 100ML
EUR 435.6

Congo Red Indicator 0.1%

COR01001 1L
EUR 301.59

Congo Red Indicator 0.1%

COR01005 500ML
EUR 90.09

Congo Red Indicator 1%

COR1005 500ML
EUR 110.98

Congo Red Indicator 0.1%

COR105 500ML
EUR 90.09

EP Reagent Sulfomolybdic Reagent R3

1086500 1L
EUR 354

EP Reagent Phosphomolybdotungstic Reagent

1065000 100ML
EUR 201.6

EP Reagent Bromocresol Green Methyl Red Mixed Indicator

1012602 100ML
EUR 52.8

EP Reagent Bromocresol Green - Methyl Red Mixed Indicator

10126021 1L
EUR 263.73

EP Reagent Bromocresol Green - Methyl Red Mixed Indicator

10126025 5L
EUR 406.8

USP Sol. Congo Red TS

USP1901 100ML
EUR 71.81

USP Sol. Congo Red TS

USP1905 500ML
EUR 118.81

FD Congo Red Solution™

PS108 500 ml
EUR 284.4

Amyloid Stain Kit (Congo Red)

AMY-1 1 kit(s)
EUR 198

Amyloid Stain Kit (Congo Red)

AMY-2 1 kit(s)
EUR 130.8

Congo Red "high purity grade"

80028 100MG
EUR 206.4
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 100MG

MTS Reagent

2808-1000 each
EUR 1188

MTS Reagent

2808-250 each
EUR 438

MTT Reagent

2809-1G each
EUR 216

MTT Reagent

2809-5G each
EUR 652.8

BOP reagent

5-02141 25g Ask for price

BOP reagent

5-02142 100g Ask for price

BOP reagent

A7015-100000 100 g
EUR 240
Description: A peptide coupling reagent. Can be used in the preparation of phenyl esters of amino acids which have been shown to be valuable as blocked derivatives of amino acids in the field of peptide synthesis.

BOP reagent

A7015-25000 25 g
EUR 135.6
Description: A peptide coupling reagent. Can be used in the preparation of phenyl esters of amino acids which have been shown to be valuable as blocked derivatives of amino acids in the field of peptide synthesis.

Traut's Reagent

2330-1000 each
EUR 418.8

Traut's Reagent

2330-500 each
EUR 248.4

VeZol Reagent

R411-01 100 ml
EUR 76.4

VeZol Reagent

R411-02 200 ml
EUR 127.6

Bluing Reagent

BRT030 30 ml
EUR 72

Bluing Reagent

BRT125 125 ml
EUR 75.6

Bluing Reagent

BRT3800 1 Gal.
EUR 220.8

Bluing Reagent

BRT500 500 ml
EUR 91.2

Bluing Reagent

BRT999 1000 ml
EUR 105.6

Chymase reagent

30C-CP1129 5 units
EUR 2622
Description: Purified native Human Chymase reagent

BURGESS REAGENT

702010 each Ask for price

Nessler Reagent

NESSR 500ML
EUR 182.4

FreeZol Reagent

R711-01 100 ml
EUR 71.2

FreeZol Reagent

R711-02 200 ml
EUR 127.2

Chromium Reagent

1206699 EACH
EUR 157.2

Bradford reagent

BDE641 100ml
EUR 73.21

Beaucage reagent

HY-100951 10mM/1mL
EUR 151.2

Bradford Reagent

GT1202-1 1
EUR 165.7

Bradford Reagent

GT1202-500 500
EUR 105.5

Cod Reagent 0-15000Ppm

24159-51 PK25
EUR 116.4

Phosphate Reagent

106199 PK100
EUR 69.6

Ninhydrin Reagent

MIC6746 EACH
EUR 31.12

Detection Reagent Concentrate, 1ML

X041-1ML 1ML
EUR 109

COD Reagent (1977 method)

WTR50W 2.5L
EUR 135.6

Convoy? Transfection Reagent

1110-1ml each
EUR 409.2

ECL Start Reagent 2000cm2

RPN3243 EACH
EUR 138

ECL Start Reagent 4000cm2

RPN3244 EACH
EUR 222

DTPA Extraction Reagent Concentrate

DTPAE01 1L
EUR 434.4

BCA Reagent, 16ML

C144-16ML 16ML
EUR 132

TDA Reagent - 10mL

MIC6732 EACH
EUR 26.33

PYR Reagent - 10mL

MIC6744 EACH
EUR 31.12

Thioacetamide Reagent

THIOR01 100ML
EUR 99.6

Olsens Extraction Reagent Concentrate

OLSER01 1L
EUR 91.2

Girard's reagent T

20-abx184099
  • EUR 243.60
  • EUR 376.80
  • 100 g
  • 500 g

Silica 3 Reagent

27169 100ML
EUR 99.6

BSA (Reagent Grade)

30-AB79 1 kg
EUR 1862.4
Description: Reagent Grade Bovine Serum Albumin (99% pure)

BSA (Reagent Grade)

30-AB81 200 grams
EUR 571.2
Description: Reagent Grade Sulphydryl Blocked BSA (99% pure)

Tri-RNA Reagent

FATRR-001 100ml
EUR 283.2

Tri-RNA Reagent

FATRR-002 50ml
EUR 211.2

Tri-RNA Reagent

FATRR-003 450ml
EUR 774

Schiff''s reagent

GT3929-1 1
EUR 113.1

Schiff''s reagent

GT3929-250 250
EUR 37.7

ECL Start Reagent 200cm2

RPN3245 EACH
EUR 26.4

EP Reagent Ferroin

1038100 100ML
EUR 96

Griess Reagent Kit

30100 1KIT
EUR 178.8
Description: Minimum order quantity: 1 unit of 1KIT

Biotin reagent (HRP)

65C-CE0202 5 mg
EUR 292.8
Description: HRP conjugated biotin labelling reagent

Alcohol, Reagent (70%)

EAS500 500 ml
EUR 94.8

Alcohol, Reagent (70%)

EAS999 1000 ml
EUR 121.2

SulfaVer 4 Reagent

2106769 PK100
EUR 78

Citric Acid Reagent

2254232 EACH
EUR 52.8

DTT (Cleland's reagent)

DB0058 5g
EUR 101.76

DTNB (Ellman's Reagent)

DB0113 5g
EUR 117.42

n-Heptane Reagent

HC5400 1L
EUR 94.8

Bottle Reagent 500ml Pyrex

B54564 PK10
EUR 124.8

Bradford Dye Reagent

0209R 100 ml
EUR 157.2

DeStreak reagent 1mL

17600318 EACH
EUR 82.8

FcR blocking Reagent

20-abx290024
  • EUR 452.40
  • EUR 619.20
  • 200 tests
  • 400 tests

Detection Reagent A

abx296004-120ul 120 ul
EUR 385.2

Alle Beteiligten können von der Umsetzung dieser Empfehlungen profitieren, die darauf abzielen, die Belastungen zu minimieren und sicherzustellen, dass mehr Studienorte und Patienten rechtzeitig Zugang zu klinischen Onkologie-Studien haben. Um eine sinnvolle Wirkung zu erzielen, ist die Annahme und konsequente Umsetzung dieser Empfehlungen in allen Studien, Sponsoren, CROs und Standorten von entscheidender Bedeutung.

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